Willkommen bei unseren FAQ zu kundenspezifischen Antikörpern! Wenn Sie spezielle Antikörper für Ihre Forschung oder Diagnostik benötigen, sind Sie bei uns genau richtig. Bei Davids verstehen wir die entscheidende Rolle, die Antikörper bei der Weiterentwicklung wissenschaftlicher Entdeckungen und der Verbesserung der menschlichen Gesundheit spielen. Dank unserer Expertise in der Antikörperproduktion können wir maßgeschneiderte Lösungen anbieten, die Ihren spezifischen Anforderungen gerecht werden.
In diesen FAQ möchten wir auf häufige Fragen und Bedenken eingehen, die Sie möglicherweise zu unseren maßgeschneiderten Antikörperdiensten haben. Egal, ob Sie neu auf dem Gebiet sind oder ein erfahrener Forscher sind, wir bieten Ihnen wertvolle Einblicke in den Antikörperentwicklungsprozess, Projektzeitpläne, Preise und vieles mehr.
Unser Team aus hochqualifizierten Wissenschaftlern und Technikern ist leidenschaftlich daran interessiert, hochwertige Antikörper zu erzeugen, die zuverlässige Ergebnisse liefern. Wir nutzen unser Wissen und unsere Erfahrung, um Sie durch jeden Schritt der kundenspezifischen Antikörperproduktion zu begleiten, vom Antigendesign und der Immunisierung bis hin zur Reinigung und Validierung. Wenn Sie diese FAQ lesen, erhalten Sie ein tieferes Verständnis für die Vorteile kundenspezifischer Antikörper, wie diese Ihre Experimente oder Diagnosen verbessern können und welche verschiedenen Anpassungsoptionen wir anbieten. Ganz gleich, ob Sie monoklonale oder polyklonale Antikörper für den Einsatz in der Immunhistochemie, Durchflusszytometrie, ELISA oder anderen Anwendungen benötigen, bei uns sind Sie an der richtigen Adresse.
Kundenspezifische Antikörper
Q: Was sind kundenspezifische Antikörper?
A: Kundenspezifische Antikörper sind Antikörper, die ein Zielantigen erkennen sollen. Sie werden durch Immunisierungen, Validierungen und Reinigungen produziert und verbessert, um die Anforderungen an die wissenschaftlichen Anwendungen zu erfüllen.
Q: Wozu benötige ich kundenspezifische Antikörper?
A: Kundenspezifische Antikörper haben viele Vorteile gegenüber kommerziell erhältlichen Antikörpern. Sie können so hergestellt werden, dass sie ein bestimmtes oder seltenes Antigen erkennen. Sie können auch eine bessere Spezifität oder Sensitivität für einzelne Anwendungen haben.
Q: Wie werden kundenspezifische Antikörper produziert?
A: Die Produktion beinhaltet die Immunisierung eines Tieres, wie Kaninchen, Hühner, Mäuse, Ratten oder Meerschweinchen mit dem Zielantigen. Das Immunsystem der Tiere erkennt das Antigen als fremdes Molekül und startet eine Immunantwort, bei der Antikörper produziert werden. Diese Antikörper werden gesammelt, gereinigt und validiert.
Q: Welche Tiere werden typischerweise für kundenspezifische Antikörper immunisiert?
A: Typischerweise werden Kaninchen, Mäuse oder Hühner immunisiert, um die Antikörper zu produzieren. Jedes Tier hat seine bestimmten Vorteile in Bezug auf Immunogenizität, Ausbeute und Produktionszeit.
Q: Wie lange dauert die Herstellung von kundenspezifischen Antikörpern?
A. Die Dauer ist von mehreren Faktoren, wie die Spezies, dem Immunisierungsplan und dem Antikörpertyp (polyklonal oder monoklonal) abhängig. Antikörper werden in der Regel zwischen wenigen Wochen und mehreren Monaten produziert.
Q: Wie wird die Antikörperspezifität während des Prozesses sichergestellt?
A: Die Antikörperspezifität wird durch gründliches Antigendesign, der Präparation des Immunogens und dem Antikörperscreening sichergestellt. Zudem validieren wir unsere Antikörper mittels ELISA oder WesternBlot, um zu bestätigen, dass die generierten Antikörper spezifisch gegen das Zielantigen gebildet wurden. Mit einem Aliquot des Testserums können unsere Kunden den Titer in ihrem Labor überprüfen.
Q: Welche Arten von kundenspezifischen Antikörpern gibt es?
A: Kundenspezifische Antikörper können entweder monoklonal oder polyklonal sein. Monoklonale Antikörper werden aus Klonen einer einzelnen B-Zelle gewonnen und erkenne ein Epitop. Polyklonale Antikörper sind eine Mischung aus Antikörpern von verschiedenen B-Zellen, die mehrere Epiope des gleichen Antigens erkennen.
Q: Können kundenspezifische Antikörper Modifiziert oder Konjugiert werden?
A: Kundenspezifische Antikörper können modifiziert oder gelabelt werden. Typischerweise handelt es sich hier um Biotinylierung, sowie die Konjugation and Enzyme oder Fluorophore. Durch diese Modifikationen ist der Einsatz der Antikörper in einer breiten Anzahl von Anwendungen, wie Immunofluoreszenz, Immunohistochemie oder der Affinitätsreinigung möglich.
Q: Wie teuer sind kundenspezifische Antikörper?
A: Die Kosten hängen von mehreren Faktoren ab. Der Antikörpertyp, der Produktionsmaßstab, Modifikationen und Reinigungsmethoden haben einen Einfluss auf die Kosten. Verwenden Sie Davids Antikörper Creator, um ein Angebot für Ihre speziellen Wünsche zu erhalten:Antibody Creator
Monoklonale Antikörper
Q: Was sind monoklonale Antikörper?
A: Monoklonale Antikörper (mAK) sind Antikörper, die aus identischen Immunzellen hergestellt werden, die alle von einem einzelnen Klon einer B-Zelle abstammen. Sie sind so designt, dass sie ein einzelnes Epitop eines Antigens erkennen und bieten somit eine hohe Spezifität und konsistente Qualität. Verglichen mit polyklonalen Antikörpern, die mehrere Epitope eines Antigens erkennen können, kann die Reaktion von Monoklonalen geringer sein.
Q: Wie werden monoklonale Antikörper hergestellt?
A: Monoklonale Antikörper werden typischerweise über die Hybridomtechnologie entwickelt. Dies schließt die Immunisierung eines Tieres mit dem Antigen, die Isolierung von B-Zellen von der Milz des immunisierten Tieres und die Fusion der B-Zellen mit Myelomazellen ein. Die daraus entstehenden Hybridoma-Zellen werden kultiviert und mittels Selektion die gewüsnchten Antikörper isoliert.
Q: Was sind die Vorteile von monoklonalen Antikörpern?
A: Monoklonale Antikörper bieten viele Vorteile, wie die hohe Spezifität und Konsistenz, sowie deren Reproduzierbarkeit. Sie können in großen Mengen und geringer Batch-zu-Batch Variabilität produziert werden. Zudem können zielspezifisch einzelne Epitope erkannt werden, was sie zu wichtigen Instrumenten in der Diagnostik und der therapeutischen Anwendung macht.
Q: Wie wird die Spezifität der monoklonalen Antikörper bestimmt?
A: Monoklonale Antikörper werden beispielsweise mit ELISA oder WesternBlot Technik validiert. Aliquots gereinigter Antikörper können bereitgestellt werden, so dass unsere Kunden in Ihren Anwendungen überprüfen können, welche Hybridomzellen die besten Antikörper bilden. Typische Anwendungen sind Immunhistochemie, Durchflusszytometrie und andere immunologische Assays. Diese Methoden helfen dabei spezifische Antikörper herzustellen, die nicht mit anderen Molekülen Kreuzreagieren.
Konjugation von Antigenen
Q: Was ist ein Antigen Carrier?
A: Ein Antigen Carrier ist ein Molekül, welches die Immunogenizität eines Antigens während der Produktion von kundenspezifsichen Antikörpern verbessert. Es hilft dabei eine stärkere Immunantwort zu erzeugen und führt zur Produktion von spezifischeren Antikörpern mit einem besseren Titer.
Q: Wann ist es notwendig einen Carrier zu verwenden?
A: Ein Carrier wird in der Regel verwendet, wenn ein Antigen für sich alleine nicht genügend immunogen ist. Dies ist beispielsweise bei sehr kleinen Antigenen oder bei Antigenen mit geringer Komplxität der Fall. Diese Moleküle werden vom Immunsystem nicht als Fremd erkannt und die Immunantwort ist mäßig. Durch den Carrier wirkt das kleine Antigen größer für das Immunsystem und es können Antikörper dagegen gebildet werden.
Q: Welche Carrier können verwendet werden?
A: Typischerweise werden Proteine, wie Keyhole Limpet Hämocyanin (KLH), Bovines Serumalbumin (BSA), Ovalbumin (OVA) oder Gluthation S-Transferase (GST) als Carrier verwendet. Diese Carrier haben eine gute Immunogenität und können die Immunogenität eines Antigens verbessern.
Q: Wie verbessert der Carrier die Immunogenität?
A: Der Carrier wirkt als größeres und komplexeres Molekül, welches das Antigen dem Immunsystem präsentiert. Dadurch werden Immunzellen, wie B- und T-Zellen stärker aktiviert, was für die Antikörperproduktion ein wichtiger Prozess ist.Das Immunsystem erkennt nach Konjugation des Antigens an den Carrier die kombinierte Struktur als Fremd und startet eine robuste Immunantwort.
Q: Muss ich etwas beachten, wenn ich den Carrier auswähle?
A: KLH bietet in der Regel die meisten Vorteile durch eine besonders starke Immunantwort. Wenn das Zielantigen allerdings aus marinen Organismen oder aus Schnecken stammt, ist es womöglich besser ein anderen Carrier zu verwenden.
Q: Kann der Carrier die Spezifität der produzierten Antikörper beeinflussen?
A: In einigen Fällen kann der Carrier eine Immunantwort gegen sich selbst starten. In diesem Fall werden Antikörper wowohl gegen das Zielantigen als auch gegen den Carrier gebildet.Aus diesem Grund empfiehlt Davids eine antigenspezifische Affinitätsreinigung bei Peptidantikörpern mit dem unkonjugiertem Peptid. Eine weitere Möglichkeit diese Antikörper zu entfernen ist die Depletion.
Q: Benötige ich in jedem Fall einen Carrier für die Antikörperproduktion?
A: Davids empfiehlt die Konjugation an einen Carrier bei kleinen Molekülen und Proteinen < 15 kDa, um eine gute Immunantwort zu erzielen. Bei größeren Proteinen oder Molekülen ist eine Konjugation an einen Carrier in der Regel nicht notwendig.
Reinigung von Antikörpern
Q: Warum ist eine Antikörperreinigung notwendig?
A: Antikörperreinigungen sind notwendig, um hochreine oder spezifische Antikörper aus Serum oder einer anderen biologischen Lösung zu erhalten. Die Reinigung entfernt unerwünschte Stoffe und sorgt somit für die richtige Spezifität und Funktionalität der kundenspezifischen Antikörper.
Q: Wie werden kundenspezifische Antikörper gereinigt?
A: Kundenspezifische Antikörper können mit unterschiedlichen Methoden, wie Protein A/G/L affinitätsgereinigt werden. Weitere Möglichkeiten sind Ionenaustauschchromatographie, Größenausschlusschromatographie und Affinitätsreinigungen, die antigenspezifische Säulen verwenden. Die Wahl der besten Reinigungsmethode hängt vom Antikörpertyp, der Menge und den Anwendungen ab, in denen der Antikörper verwendet werden soll.
Q: Was ist eine Protein A/G/L Reinigung?
A: Protein A/G/L ist eine affinitätschromatographische Reinigung von Antikörpern. Diese Proteinliganden binden den Fc Teil der Antikörper und erlauben eine selektive Reinigung dieser. ProteinA Material ist spezifisch für IgG Subklassen, wohingegen ProteinG ein breiteres Spektrum an Spezies und Subklassen bindet. Protein L ist ebenfalls spezifisch für diverse IgG Subklassen. Das Ergebnis einer solchen Reinigung sind Gesamt-IgG Fraktionen mit spezifischen und unspezifischen Antikörpern.
Q: Was ist eine Ionenaustauschchromatographie?
A: Bei einer Ionenaustauschchromatographie werden Antikörper nach ihrer Ladung von anderen Molekülen getrennt. Es werden stationäre Phasen mit geladenen Gruppen (entweder Positive Kationenaustauscher oder negative Anionenaustauscher) verwendet, um die Antikörper mit entgegengesetzter Ladung anzuziehen und zu binden. So ist eien Separation zu anderen Molekülen möglich.
Q: Was ist eine Größenausschlusschromatographie?
A: Bei einer Größenausschlusschromatographie werden Antikörper basierend auf ihrer Größe von anderen Molekülen getrennt. Eine poröse Matrix mit kleinen Löchern erlaubt es kleineren Molekülen mit den Beads in Interaktion zu treten. Aus diesem Grund laufen diese langsamer und eluieren später. Große Antikörper werden in der Regel früher eluiert, da sie nicht in die Löcher passen. So können auch Dimere oder IgG von IgM getrennt werden.
Q: Können Affinitätsreinigungen mit antigenspezifischen Säulen für die Reinigung verwendet werden?
A: Antigenspezifische Matrizen können für die Reinigung von spezifischen Antikörpern verwendet werden. Das Antigen wird dabei an eine feste Matrix immobilisiert, so dass die spezifischen Antikörper binden können. Die Elution erfolgt in der Regel mit einem pH-Shift oder mit kompetitiven Reagenzien. Das Ergebnis sind antigenspezifische Antikörper.
Q: Sollte ich etwas beachten, wenn ich die Antikörper in verschiedenen Anwendungen verwenden möchte?
A: Die Art der Anwendung kann die Reinigungsstrategie beeinflussen. Wenn die Antikörper in funktionellen Studien oder in in vivo Anwendungen verwendet werden, sind gegebenenfalls weitere Reinigungsschritte, wie die Entfernung von Endotoxinen notwendig, um optimale Ergebnisse zu erzielen.
Q: Können gereinigte Antikörper modifiziert oder konjugiert werden?
A: Gereinigte Antikörper können an einen Farbstoff, wie FITC oder ein Enzym, wie HRP (Horse Radish Peroxidase) oder AP (Alkaline Phosphatase) konjugiert werden.
Q: Wie groß ist die Ausbeute bei gereinigten kundenspezifischen Antikörpern?
A: Die Ausbeute ist von vielen Faktoren, wie das Ausgangsmaterial, die Reinigungsmethode und die Antikörperfraktion abhängig. Wenn Sie weitere Fragen zur theoretischen Ausbeute haben können Sie uns gerne schreiben.
Lagerung von Antikörpern
Q: Wie werden die Antikörper versendet?
A: Davids versendet Ihre Antikörper mit Kühlakkus. Bitte beachten Sie, dass die Antikörper auch bei Raumtemperatur über mehrere Tage stabil sind. Selbst wenn die Paketzustellung verzögert ist, hat dies keinen Einfluss auf die Antikörperaktivität.
Q: Wie soll ich die Antikörper nach der Ankunft lagern?
A: Davids empfiehlt die Antikörper bei 2 - 8°C zu lagern.
Q: Kann ich die Antikörper einfrieren?
A: Davids empfiehlt nicht, die Antikörper einzufrieren. Jeder Einfirer-Auftau-Zyklus kann die Aktivität der Antikörper verringern. Wenn Sie die Antikörper dennoch einfrieren möchten, empfehlen wir mit einem kleinen Aliquot zu testen, ob die Antikörper nach dem Einfrieren und Auftauen die gleiche Aktivität aufweisen.
Q: Sind die Antikörper konserviert?
A: Davids verwendet Natriumazid zur Konservierung der Antikörper. Wenn Sie Antikörperlösungen ohne Konservierungsmittel benötigen können Sie dies vor dem Projektstart festlegen. In diesem Fall können wir den Puffer ändern oder die Antikörper steril filtrieren.
Bestellprozess
Q: Wie kann ich die Antikörper bei Davids bestellen?
A: Der Bestellprozess wird so einfach wie möglich gehalten. Wir empfehlen, dass Sie sich über unseren Antikörper Creator (Antibody Creator ) ein Angebot erstellen und zusammen mit Ihrem Antigen zu uns schicken.
Q: Wie kann ich Peptidantikörper bestellen?
A: Wenn Sie uns Ihre Aminosäuresequenz des Zielproteins in einer Email zuschicken, schlägt Davids Ihnen Peptide vor, die Ihr Protein repräsentieren. Wenn Sie im Anschluss mit der Bestellung fortfahren möchte, können Sie die Peptide einfach per Email bestätigen, damit wir mit der Synthese beginnen können.
Q: Benötige ich eine PO Nummer?
A: Davids benötigt keine PO Nummer, um den Auftrag zu bearbeiten. Es gibt aber viele Firmen und Universitäten, die eine PO Nummer auf dem Lieferschein und der Rechnung benötigen, um den Auftrag korrekt zuzuordnen. In diesem Fall können Sie uns Ihre PO Nummer nennen, damit wir diese mit Ihrem Auftrag verknüpfen können.
Vertraulichkeit und Rechtliches
Q: Kann ich meine Antikörper für ein Patent oder eine Publikation verwenden?
A: Nach der Bezahlung gehen alle Rechte der Antikörper an unsere Kunden über. Sie können sie für Ihre wissenschaftlichen Experimente oder Veröffentlichungen verwenden.
Q: Werden meine Daten vertraulich behandelt?
A: Bei Davids verstehen wir, dass alle wissenschaftlichen und kundenbezogenen Daten wichtig sind. Aus diesem Grund gehen wir mit allen Daten sorgfältig um. Das schließt Sequenzen, Proteinnamen und kundenspezifische Daten ein.
Q: Wo kann ich Referenzen zu Antikörpern von Davids finden?
A: Wie bereits erwähnt gibt Davids keine Daten von Kunden weiter. Aus diesem Grund können wir keine Referenzen angeben Wenn Sie im Internet oder auf gängigen Datenbanken für Publikationen nach "Davids Biotechnologie" suchen, werden Sie eine Vielzahl von Veröffentlichungen finden, die Antikörper von Davids verwenden.