Antikörperproduktion mit Proteinen

Proteine in Ihrer nativen oder denaturierten Form sind die Antigene, die am häufigsten für die Produktion von Antikörpern verwendet werden. Die Immunogenität ist verglichen mit anderen Antigenen oft besser, da mehrere Epitope vorhanden sind, an die Antikörper binden können. Des Weiteren ist die Verfügbarkeit der Epitope für die Antikörper in Ihren Anwendungen sehr hoch, wenn Sie mit dem gleichen Antigen auch die Immunisierungen durchführen. Dadurch können die Antikörper an der korrekten Stelle im Protein binden und sind somit nachweisbar.
Die Immunisierung kann mit jeder Protein-Reinheit durchgeführt werden. Allerdings werden mit hoher Wahrscheinlichkeit auch Antikörper gegen die Verunreinigungen gebildet. In diesem Fall ist eine zusätzliche Reinigung mittels SDS-Gel möglich. Schneiden Sie Ihre antigen-spezifischen Banden heraus und schicken uns diese Gelstücke. Wir extrahieren Ihr Antigen aus den Gelstücken.
Für Proteine mit einem tag können wir mittels Depletion die Antikörper aus der Fraktion entfernen, die den tag erkennen. Dies empfehlen wir, wenn die tag-Antikörper in Ihren Anwendungen stören.

Protein

Schicken Sie Ihr Protein oder kleine Proteinteile an Davids Biotechnologie GmbH, Röntgenstraße 3, 93055 Regensburg, Germany. Wir starten mit den Immunisierungen, sobald Ihr Antigen bei uns eintrifft. Sie können das Antigen lyophilisiert oder gelöst schicken. Geeignete Puffer finden Sie unter Puffer Anforderungen. Wenn Sie Proteine mit einem tag als Antigen verwenden möchten, finden Sie weitere Informationen hier: Weitere Informationen.
Lyophilisierte Proteine können in der Regel bei Raumtemperatur versandt werden. Gelöste Proteine sollten gekühlt mit Eis-Packs oder Trockeneis versandt werden.

	Kaninchen	Huhn	Maus	Ratte	Meerschwein
Für die Immunisierung	0,5 - 1 mg	0,5 - 1 mg	100 - 250 µg	100 - 250 µg	200 - 500 µg
Für die Affinitätsmatrix	0,5 - 2 mg	0,5 - 2 mg	0,5 - 2 mg	0,5 - 2 mg	0,5 - 2 mg
Empfohlene Konzentration	0,3 - 2 mg/ml	0,3 - 2 mg/ml	0,3 - 2 mg/ml	0,3 - 2 mg/ml	0,3 - 2 mg/ml
Puffer	Physiologische, nicht-toxische Puffer, wie 1 x PBS oder 0,9% NaCl. Weitere Informationen erhalten Sie unter Puffer Anforderungen

Proteine von SDS-Gelstücken

Cat.No.A703

Gelstücke von SDS-Gelen sind einfach zu handhaben und haben den Vorteil, dass man Zeit und Geld durch komplizierte Reinigungsschritte sparen kann. Des Weiteren können sogar kleine Proteinverunreinigungen entfernt werden, indem nur die spezifischen Gelbanden ausgeschnitten werden.
Die Immunisierung mit Gelstücken ist einfach: Erstellen Sie eine Proteinlösung mit mindestens 0,5 mg Protein für die Immunisierung von einem Kaninchen und zusätzliche 0,5 mg Protein, wenn Sie eine Affinitätsreinigung benötigen. Tragen Sie die Proteinlösung auf mehrere Banden des Gels auf, färben und entfärben das Gel nach dem Lauf und schneiden Ihre Protein-Spezifische Banden heraus. Schicken Sie die Gelstücke in einem 2-ml oder 15-ml Gefäß bei Raumtemperatur ohne die Zugabe von Flüssigkeiten an: Davids Biotechnologie GmbH, Röntgenstraße 3, 93055 Regensburg, Germany
Die finalen Antikörper sind in der Regel sehr gut für WesternBlot oder Anwendungen geeignet, bei denen Sie das denaturierte Protein detektieren möchten. In anderen Anwendungen, bei denen Sie das native Protein detektieren möchten, hat die Immunisierung mit dem nativem Protein Vorteile.

Alternativen, wenn Ihr Protein nicht verfügbar ist

Wenn Ihr Protein nicht verfügbar ist können Sie unseren Peptidantikörper Service verwenden. Hier schlagen wir Ihnen Peptide vor, die Ihr Protein repräsentieren. Wenn Sie das Expressionsplasmid zur Verfügung haben, exprimieren wir Ihr Protein in E. coli: Expressionsservice. Wenn Sie andere Antigene haben, die Sie für die Immunisierungen verwenden möchten, gehen Sie zu unserer Antigenübersicht oder schreiben uns eine Email: info@davids-bio.com.

Zusätzliche Informationen

Proteine mit Tag

Wenn gereinigte Proteine mit einem Tag als Antigen verwendet werden, erhält man Antikörper, die neben Ihrem Antigen auch den Tag erkennen. Wenn diese anti-tag Antikörper im Assay stören gibt es mehrere Möglichkeiten diese Antikörper aus dem Serum zu entfernen. Unser Depletion Service Cat.No.R101 entfernt die anti-tag Antikörper aus dem Serum mit unserer tag-Depletion Chromatographie.
Wenn Sie eine Affinitätsreinigung bestellen, können wir die anti-tag Antikörper auch entfernen, indem wir für die Erstellung der Affinitätsmatrix entweder ein Antigen ohne tag oder ein Antigen mit einem anderen tag verwenden. So kann für die Immunisierung ein Antigen mit HIS-tag verwendet werden und für die Affinitätsreinigung ein nicht-getaggtes oder ein STREP-getaggtes Protein.

Kleines Protein

Für Proteine, die kleiner als 15 kDa sind, empfehlen wir eine Konjugation des Proteins an einen Carrier. Die Konjugation des kleinen Proteins an ein größeres Trägermolekül aktiviert das Immunsystem des Tieres und führt in der Regel zu einem besseren Titer. Für weitere Informationen gehen Sie zu unseren Konjugations Services.

Reinheit der Proteine für die Produktion von Antikörpern

Wir produzieren Ihre Antikörper von Antigenen mit jedem Reinheitsgrad. Bitte beachten Sie, dass auch Antikörper gegen die Verunreinigungen gebildet werden. Wenn Sie spezifische Antikörper auch von wenig reinen Proteinen benötigen, empfehlen wir unseren SDS-Gelextraktionsservice oder eine anschließende Affinitätsreinigung mit einem reinen Protein.

Bestellprozess

Davids gestaltet den Kauf und die Bestellungen von Antikörpern so einfach wie möglich. Senden Sie Ihr Antigen an:

Davids Biotechnologie GmbH
Röntgenstraße 3
93055 Regensburg
Deutschland

Die Immunisierungen beginnen in der Regel am gleichen Tag, wenn das Antigen in unserem Labor eintrifft. Bitte legen Sie dem Antigen folgende Informationen bei, damit wir das Antigen Ihrem Auftrag zuordnen können und damit den Prozess beschleunigen:

1. Ihr Antigen
2. Konzentration & Pufferbestandteile von Ihrem Antigen
3. Unser Angebot, unser Bestellformular oder Ihre offizielle PO
4. VAT Nummer (nur für Kunden aus der EU, mit Ausnahme von deutschen Kunden)

Wenn Sie Peptidantikörper bestellen möchten, schicken Sie uns Ihre Proteinsequenz. Wir schlagen Ihnen Peptide vor, die Ihr Protein repräsentieren. Für weitere Informationen: Peptidantikörper