Antigen Synthese und Präparation

Für die Antikörperproduktion können nahezu alle Antigene verwendet werden. In der Regel werden Proteine, Peptide, SDS-Gelstücke, DNA, Zellen oder kleine Moleküle, wie Toxine, Haptene oder Medikamente verwendet, um polyklonale und monoklonale Antikörper herzustellen.

Präparation von Antigenen

Einige Antigene müssen vor der Immunisierung präpariert werden, um zum Beispiel die Antigenizität von kleinen Molekülen zu erhöhen. Die Antigenkonjugation an ein Trägermolekül (Carrier) oder der Einschluss des Antigens in Liposomen können bei kleinen Antigenen durchgeführt werden, um die Antigenizität zu erhöhen. Zellen sollten stets mit Davids Zellimmunisierungs Kit präpariert werden, damit die Oberfläche der Zellen optimal dem Immunsystem präsentiert werden. Tabelle #1 zeigt die empfohlene Vorgehensweise für die verschiedenen Antigene. Tabelle #2 zeigt die empfohlenen Puffer für die Antigene.
Wenn Sie Fragen zu unseren Services oder zu Ihrem Antigen haben können Sie uns eine Email schreiben: info@davids-bio.com.

Antigen Auswahl - Welches Antigen ist am besten für meine Anwendungen geeignet

Produktion von Antikörpern mit Ihrem Antigen. Wir starten mit den Immunisierngen sobald Ihr Antigen in unserem Labor eintrifft oder wenn die Produktion Ihres Antigens abgeschlossen ist.

1. Das Protein ist verfügbar
   Wenn das gereinigte Protein in ausreichender Menge vorhanden ist, ist das native Protien in der Regel die beste Wahl für die Antikörperprouktion. Wenn das Protein schwierig zu reinigen ist, oder wenn eine Vielzahl von Banden im SDS-Gel vorhanden sind können wir SDS-Gelstücke für die Immunisierung verwenden. Vor der Immunisierung extrahieren wir das Protein aus den Gelstücken nachdem Sie die spezifischen Gelbanden ausgeschnitten haben.
2. Das Protein ist nicht verfügbar
   Sie können mit unserem Peptidantikörperservice Antikörper von Proteinen herstellen, von denen Sie nur die Sequenz kennen. Unsere Wissenschaftler helfen Ihnen bei der Auswahl geeigneter Peptide, die Ihr Protein repräsentieren können. Die Antigenizität, Löslichkeit und die Epitope der Peptide werden von unseren Wissenschaftlern mit Hilfe unseres Vorhersage-Algorithmus überprüft, um geeignete Peptide vorzuschlagen. Dieser Service umfasst die Peptidvorhersage vor der Bestellung, die Synthese des Peptides und die Konjugation der Peptide an ein Trägermolekül.
3. Weitere Antigene für die Antikörperproduktion
   Darüber hinaus bieten wir die Immunisierung mit Antigenen, wie DNA, Zellen, Viruspartikeln, Toxinen und kleinen Molekülen an. Nähere Informationen zur Handhabung der Antigene finden Sie in den folgenden Tabellen. Jedes Molekül benötigt gegebenenfalls eine individuelle Präparation.

Antigen

Die Tabelle zeigt die am meisten verwendeten Antigene für die Herstellung von Antikörpern in Kaninchen, Hühnern, Mäusen, Ratten und Meerschweinchen. Einige Antigene benötigen eine Präparation vor der Immunisierung, um die Antigenizität zu optimieren oder um das Antigen optimal zu präsentieren.

	Antigen	Präparation	Informationen
	Protein	Wir verwenden Ihr Protein für die Immunisierungen	Wir starten mit dem Immunisierungsprozess sobald Ihr Antigen bei uns eintrifft
	Protein Expression	Wir produzieren Ihr Antigen	Expression Ihres Plasmids in E. coli für die Antikörperproduktion
	Protein (SDS-Gel)	Schneiden Sie die Antigen-Spezifischen Banden aus dem Gel	Sparen Sie zeit- und kostenintensive Reinigungsschritte Ihres Antigens
	Peptide	Wir synthetisieren und konjugieren Ihr Peptid oder verwenden Ihr Peptid für die Immunisierungen	Wir helfen Ihnen bei der Peptidauswahl, Synthese und/oder Konjugation
	Zellen	Verwenden Sie unser Zell-Immunisierungs-KIT für die optimale Präparation Ihrer Zellen	Senden Sie uns Ihre präparierten Zellen zu
	DNA	Wir bereiten Ihre DNA für die Immunisierungen vor	Senden Sie uns Ihre DNA und wir präparieren diese für die Immunisierungen
	Small Molecules	Wir präparieren Ihre kleinen Moleküle für die Immunisierungen	Bitte kontaktieren Sie uns, wenn Sie kleine Moleküle oder Toxine für die Immunisierung verwenden möchten

Anforderungen an den Puffer

Das Antigen kann in jedem nicht-toxischen Puffer gelöst werden. Alternativ können Sie uns auch lyophilisierte Antigene schicken.
Die Tabelle zeigt Substanzen, die ab einer gewissen Konzentration im Puffer stören können. Die maximale Konzentration für diese Stoffe bezieht sich auf eine Antigenkonzentration von 1 mg/ml. Sie können Ihr Antigen dementsprechend mit einem Puffer ohne diese Substanzen verdünnen, wenn die Konzentration höher liegt. Gerne helfen wir Ihnen die Stoffe aus dem Puffer zu entfernen oder schlagen Ihnen Alternativen vor.

Puffer Inhaltsstoff	Maximale Konzentration
Urea	2 M
NaCl	200 mM
Imidazol	200 mM
Dithiothreitol (DTT)	2 mM
Citrat or Acetat	100 mM
Glycerol	10%
SDS	0,1%
EDTA	1 mM
TRIS	100 mM

Puffer
Triton X-100

Zusätzliche Informationen

Wir führen ELISA Titer Bestimmungen als Qualitätskontrolle für unseren Antikörperservice durch. Die ELISA Ergebnisse können bei Antigenen, wie SDS-Gelstücke oder Zellen vom echten Titer abweichen. Nicht jedes Bakterium oder jedes Antigen bindet an unsere ELISA Platten ohne eine vorherige Optimierung der ELISA Methoden. Das gleiche gilt für denaturierte Proteine, die mit SDS-Molekülen benetzt sind. Bitte schreiben Sie uns, wenn Sie weitere Fragen haben.